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湖北原位雜交-貝科新肽科技公司-植物組織原位雜交

武漢貝科新肽科技有限公司

  • 主營產品:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
  • 公司地址:湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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信息詳情
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結合,雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯的單與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎上又發展了多彩色熒光原位雜交技術和染色質纖維熒光原位雜交技術.











根據核酸探針標記物的種類分別進行自顯影或利用酶檢測系統進行不同顯色處理。細胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進行半定量的測定,如自顯影可利用人工或計算機輔助的圖象分析檢測儀(computer-assisted image analysis)檢測銀粒的數量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細胞或組織可利用酶檢測系統顯色,然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數量的核酸的顯色強度進行檢測。



原位雜交技術的技術流程

原位雜交技術的技術流程包括樣本處理、探針制備、雜交反應和信號檢測等步驟。樣本處理包括組織或細胞的固定、包埋、切片和脫氧核糖核酸酶消化等步驟,目的是保持組織或細胞的原始結構和核酸序列的完整性。探針制備包括標記探針、純化和變性等步驟,目的是提高探針的特異性和敏感性。雜交反應包括預雜交、雜交和洗脫等步驟,目的是使探針與目標核酸序列形成雙鏈復合物。信號檢測包括顯色反應、熒光染色和性同位素標記等步驟,目的是可視化目標核酸序列的分布。



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